第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来目的基因的溶解曲线基本没有,模板浓度已经从10倍稀释,到倍稀释,到2倍稀释了.目的基因还是跑不

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/12 06:14:13
第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来目的基因的溶解曲线基本没有,模板浓度已经从10倍稀释,到倍稀释,到2倍稀释了.目的基因还是跑不

第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来目的基因的溶解曲线基本没有,模板浓度已经从10倍稀释,到倍稀释,到2倍稀释了.目的基因还是跑不
第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来
目的基因的溶解曲线基本没有,模板浓度已经从10倍稀释,到倍稀释,到2倍稀释了.目的基因还是跑不出来,内参基本都差不多,但荧光值都不是很高.

第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来目的基因的溶解曲线基本没有,模板浓度已经从10倍稀释,到倍稀释,到2倍稀释了.目的基因还是跑不
问题有可能如下:
1) 模板制备有问题.你可以用普通PCR扩增,然后电泳确定是不是模板有问题?
2) 引物问题:引物设计的好与否,对Realtime 结果至关重要!可以用普通PCR确定你的引物扩增效率如何?模板可以选取一个阳性质粒当模板.
3) Realtime 体系配置出问题:好好想一下,该加的东西都加了没?模板、染料、taq酶、等.
并且各个试剂的量一定要确定没问题!
4) 程序设置:仪器的程序设置,plate的编排、退火温度、等等.

没有学过,高中化学也很差,所以,不知道!!!
抱歉啊,帮不了你!!!

第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来目的基因的溶解曲线基本没有,模板浓度已经从10倍稀释,到倍稀释,到2倍稀释了.目的基因还是跑不 ,第一次做荧光定量PCR,内参基因可以跑出来,但是荧光峰度比较低,溶解曲线也不错,但目的基因完全跑不出目的基因在普通PCR仪上,可以跑出来,跑电泳条带清晰,引物二聚体不明显.但是在realtime-p 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! 我要做荧光定量PCR,测细胞因子mRNA,要测三种因子,是否是把三种引物和内参基因引物分别加入到四个体系中 请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct值在25左右 还想再向您请教下 关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢 荧光定量PCR哪个公司做的好?阅微基因在荧光定量PCR做的效果如何? 实时荧光定量pcr内参是什么东西怎么知道自己要买哪个内参 荧光定量pcr标准曲线中的扩增效率太高怎么办做荧光定量标准曲线,同时做内参β-actin和自己的基因SA,结果内参相关系数为1.000,扩增效率为99.7%,SA相关系数为0.990,扩增效率为137.3%,初始模板浓度 做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢? 不同阶段的荧光定量实验都需要做目的基因及内参基因的标准曲线吗 rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA 有哪位老师在阅微基因做荧光定量PCR呢?现在想做荧光定量PCR,朋友介绍去阅微基因,来交流下, RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些? 请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确?那么怎么平衡扩增效率呢? 我准备做定量PCR,需要检测的基因大约有10个左右,请问我需要多少个内参基因?只用1个内参行不行?我们实验室经常用18S和β-actin两个内参,是不是内参越多越好?怎样去选择最合适的内参基因呢 关于金银花荧光定量试验中的内参基因选择问题!求助,我要做一个关于金银花定量实验,不知道怎么选择内参基因,同学告诉我说要先筛选几个内参,内参基因可以直接去生物公司合成,不知道内 我现在要做荧光定量PCR,有3个目的基因,以ACTIN基因作为内参,分析其在根茎、根、茎、叶的表达情况,现在我不清楚应该怎么做,具体步骤是怎么样,我用的是SYBR® Premix Ex TaqTM这个试剂盒,电泳