作业帮什么是realtime-PCR溶解曲线
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/27 23:07:12
什么是realtime-PCR溶解曲线
什么是realtime-PCR溶解曲线
什么是realtime-PCR溶解曲线
溶解曲线分析可以用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物.扩增反应完成后,通过逐渐增加温度同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线,随着反应中双链DNA变性,荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低,用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图,在扩增产物的溶解温度上有一特征峰（Tm,DNA双链解链50％的温度）,用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开,因为它们在不同的温度溶解.
这个一般是用SYBY Green作为荧光染料的时候需要做的工作!
因为SYBY Green染料是非特异的染料,只要有扩增,染料就可以镶嵌在双链中发出荧光.我们做溶解曲线是为了观察我们扩增发出荧光的片段是不是我们需要的产物.如果溶解曲线做出来只有单峰,且出锋位置是你的退火温度,那么这个是你的产物发出的荧光,实验结果有效.如果出现多锋或退火温度不对,那么这个实验结果是不可信的!你需要再次调整!
扩增反应完成后，对PCR产物加热，随着温度的升高，双链扩增产物逐渐解链，导致荧光强度下降，到达某一温度（即Tm）时，会导致大量的产物解链，荧光急剧下降。利用该特点以及不同PCR产物其Tm值的不同，因此使其荧光信号发生迅速下降的温度也不同，可通过此对PCR产物的特异性进行鉴定。...
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扩增反应完成后，对PCR产物加热，随着温度的升高，双链扩增产物逐渐解链，导致荧光强度下降，到达某一温度（即Tm）时，会导致大量的产物解链，荧光急剧下降。利用该特点以及不同PCR产物其Tm值的不同，因此使其荧光信号发生迅速下降的温度也不同，可通过此对PCR产物的特异性进行鉴定。
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什么是realtime-PCR溶解曲线
realtime PCR的溶解曲线只有一个峰为什么会有二条带?
realtime pcr 染料分哪几种?
什么是realtime PCR,什么是q-pcr,所用反应物质与普通PCR有何不同稍微详细点,最好附加点做的注意事项.查查百度百科什么的,我也会.另外RealTime-q-pcr 是不是就是q-pcr?
荧光定量PCR溶解曲线问题
,第一次做荧光定量PCR,内参基因可以跑出来,但是荧光峰度比较低,溶解曲线也不错,但目的基因完全跑不出目的基因在普通PCR仪上,可以跑出来,跑电泳条带清晰,引物二聚体不明显.但是在realtime-p
realtime pcr 怎么求标准误?
Realtime PCR与Northern blotting优缺点比较
RT-PCR和realtime-PCR有啥区别么?
怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线
实时荧光定量PCR结果中溶解曲线的
做realtime-pcr时,绝对定量标准曲线的制作我第一次做realtime pcr,是做转基因拷贝数的鉴定.我是拿到公司去做,但是公司要求提供做绝对定量标准曲线的标准品,标准品该怎么制备?我查了一些文献,
PCR问题,溶解曲线只在荧光染料PCR中有么?代表那些数据间的关系.
realtime ）就是想做个梯度稀释的cDNA的标准曲线,请问我应该怎么做,我用的是Roche的荧光定量PCR仪,请问我是选相对定量还是绝对定量做曲线啊?
Q-PCR溶解曲线怪异图：请问为什么左边这么高?这是溶解曲线图
如何分析定量pcr 溶解曲线有一条溶解曲线,可以得出什么结论,能否得出Ct值,
realtime pcr 预实验的问题做realtime pcr 时,设计好引物后,用普通的pcr仪跑没有条带,是怎么回事啊?这样还能做realtime吗?排除引物设计的问题,因为是公司设计的.
请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大