用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/06 18:49:43

用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?

左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100

用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
首先一个问题是你的胶做得不好,这种情况其实很简单就可以解决,配方正确的基础上,只要融化的完全,冷却的完全,就可以避免,为什么大家都那么着急,很多人的marker都这个样子,不要急于一时.
再有个你的目的条带如果是250左右那就问题不大,这次结果拖尾严重最主要是胶的问题.
如果不是250左右,但是又出现这个大小的条带,那么还是考虑一下引物的问题吧.
不管核算还是蛋白电泳做一个好的胶才是出好结果的关键啊

　　怎么看不到图。
　　那条250左右的条带是目的产物吗？如果不是，那你需要优化PCR条件。如果是，那也不奇怪，pfu的扩增效率经常比普通taq低。如果目的产物是250bp的话，你用pfu换不如用普通taq酶，普通taq虽然有错配，但是多挑两个克隆就可以了。我后来有做了不同温度的PCR 结果和上面的都是一样的！你那个700bp的产物用普通taq酶能PCR出来吗？...

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　　怎么看不到图。
　　那条250左右的条带是目的产物吗？如果不是，那你需要优化PCR条件。如果是，那也不奇怪，pfu的扩增效率经常比普通taq低。如果目的产物是250bp的话，你用pfu换不如用普通taq酶，普通taq虽然有错配，但是多挑两个克隆就可以了。

收起

我需要知道PCR出来的片段序列以便更好的分析。

用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100 关于pfu酶扩增PCR产物在做PCR时,用pfu聚合酶扩增出来的产物都是平末端的吗?就是说不管引物序列5'端加的的酶切位点是平末端的还是粘性末端的,只要是用pfu聚合酶扩增出来,那么产物都是平末 5U/ul 250 U/支 pfu酶,需要加入0.25ul,请问,需要,多少U的pfu酶?PCR中,这个酶需要多少量? promega的Pfu怎么样 taq酶和pfu酶的区别 PCR试验的步骤请问Pfu DNA Polymerase用于PCR能保证扩增多大的片段无错配? 2×Pfu PCR MasterMix（含染料）为什么那么多人推荐博凌科为的? 博凌科为的2×Pfu PCR MasterMix适合大规模基因检测吗? 我们实验室要进一批2×Pfu PCR MasterMix 不知都选择哪家的好? 用Pfu酶和Taq在相同条件下进行PCR,结果是Pfu酶能够扩增到目的条带,而Taq酶没有,是为什么呢?提取出的DNA用TE溶解后加了RNase,但是RNase对PCR没有太大的影响啊 pcr的实验步骤是什么样子的?pcr实验步骤如何提高pfu聚合酶的扩增效率为什么普通的聚合酶能扩,高保真酶pfu不能扩啊是不是退火温度不对啊我加了镁啊，退火温度是做的梯度也没有目的带，延伸时间也增加了一倍，是按照说明书调的延伸时间，1kb延伸2分钟,我 DE2A电子经纬仪怎么打开指向激光?我按照说明书的步骤还是不行. 怎么回事? 什么是PFU公会强大一些的PFU公会有哪些不要WOW的荧光定量pcr中关于阈值的设置是否会影响Ct值?我用的荧光定量PCR仪为ABI7500,按照说明书,PCR结束后需要对每个反应的阈值和基线进行手动调整,但是在模板相同的条件下,不同批次的反应之间的跪求MyCycler 个人普通 PCR 仪 / 梯度 PCR仪的使用说明书