请教下用cDNA作为模板跑PCR相关经验?我想请教下高手:用PCR扩增同一个基因的时候,为什么用基因组DNA作为模板的时候很好扩出来,而且条带很亮,但用cDNA扩增同样的这个基因时确没扩出来或扩

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 17:59:55
请教下用cDNA作为模板跑PCR相关经验?我想请教下高手:用PCR扩增同一个基因的时候,为什么用基因组DNA作为模板的时候很好扩出来,而且条带很亮,但用cDNA扩增同样的这个基因时确没扩出来或扩

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请教下用cDNA作为模板跑PCR相关经验?
我想请教下高手:用PCR扩增同一个基因的时候,为什么用基因组DNA作为模板的时候很好扩出来,而且条带很亮,但用cDNA扩增同样的这个基因时确没扩出来或扩出的条带很暗,2种模板扩增条件都设置成是一样的,请教下大家为我解答.谢谢.
引物是设计到这个基因的编码区中间的。不知道提高温度可不可以扩的出来,准备试试。
还有就是cDNA放在负80摄氏度快一年了,不知道影响会不会很大。

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你的引物是设计到这个基因编码区的什么位置的?
你考虑下是不是cDNA的降解问题.
还有你试验的时候降低退火温度,不要提高.提高更扩不出来了.

再提高温度是肯定扩增不出来的,你可以以你现在使用的退火温度为上限做一个梯度PCR重新摸索一下条件。
cDNA是比较稳定的,在-80摄氏度保存一年时间作为模板使用仍然应该是有效的。

请教下用cDNA作为模板跑PCR相关经验?我想请教下高手:用PCR扩增同一个基因的时候,为什么用基因组DNA作为模板的时候很好扩出来,而且条带很亮,但用cDNA扩增同样的这个基因时确没扩出来或扩 用普通RT试剂盒(富酶泰斯的)逆转录出的cDNA,可作为实时荧光定量PCR反映中的DNA模板用嘛? 急!请问根据小麦小G蛋白的cDNA基因设计引物,用小麦总DNA作为模板,用PCR能扩增出小麦小G蛋白的基因片...急!请问根据小麦小G蛋白的cDNA基因设计引物,用小麦总DNA作为模板,用PCR能扩增出小麦小G 制备cdna探针时,首先需提取,分离获得___作为模板,在___的催化下合成cdna探针 DNA,RNA,cDNA在实验中作为模板的要求是什么?不仅是PCR,其他生物实验它们三个作为模板的要求还有什么?我是初学者~还有比如酶切之类~ 用基因组DNA做模板进行PCR扩增,设计引物所选序列也用cDNA为模板有什么不同是用这两个模板做pcr,在设计引物时,设计引物所用的序列有区别么 pcr 模板 全部rna转录出来的cdna好 还是直接买来的基因的cdna好 荧光定量pcr引物设计原理在做荧光定量PCR预试验,先用普通pcr仪器跑的,模板是用CDNA.在设计引物的时候是不是必须俩个外显子跨过一个内含子?就是上下游引物必须落在俩个外显子上?我就按这 请问你做PCR之后出现弥散的带,现在解决了吗,怎么解决的?我用cDNA做模板,也出现这种情况. 胁迫处理过的RNA反转的cDNA用作模板做PCR,产物能否做转基因 请问想问下在以cDNA为模板时,PCR的结果却是徒步 什么原因 定量PCR是不是一定要以cDNA作模板,可不可以直接拿总DNA作模板直接做定量? kb cDNA CTK PCR cDNA是双链么real time PCR为何用cDNA 而不是用直接提取的DNA做 全长cDNA PCR已知cds序列的开头20bp左右作为forward primer,结尾的20bp左右互补序列作为reverse primer,Tm值相差不超过5度.用total RNA 的 T7 RT cDNA作为模版,准备扩增全长cDNA序列,但是总是p不出产物来,是什 RT-PCR模板选择问题.我是准备设计简并引物扩增一个鱼类的未知基因的保守区.一些文献上是提取脑部总RNA,然后反转录得到第一链CDNA,然后用这CDNA做模板扩增保守区.但是我老师的想法是直接提 pcr,cDNA引物的问题用真核细胞mRNA反转录出来的cDNA来做引物进行pcr扩增,模板DNA是什么呢?如果是真核细胞中提取的DNA,那不也是有内含子的么?那我怎么来得到目的基因呢?第一个的意思是,在做m 以DNA为模板扩增序列,连接,转化,测序时跟用cDNA做模板一样吗?