sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.主要是我看分离胶里没有蛋白,我就

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 07:07:08
sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.主要是我看分离胶里没有蛋白,我就

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sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?
跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.
主要是我看分离胶里没有蛋白,我就想会不会在浓缩胶里。所以给浓缩胶也一起染色的。上样缓冲液用的是2倍的买的蛋白marker上说明书上说的那个配方。用的就是20UL蛋白提取液20ul的上样缓冲液。

sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.主要是我看分离胶里没有蛋白,我就
首先,我建议你到丁香园或者说中国生命科学论坛发帖求助,能更快得到答案.
其次,你的问题说的不太清楚.譬如说你测得的蛋白浓度是多少呢?你有跟BSA标准曲线比对一下么?会不会是蛋白浓度太低需要浓缩呢?也有可能说你的分离胶和浓缩胶的浓度不适合你的蛋白.另外你跑的是什么蛋白呢?是比较纯的蛋白还是全蛋白呢?如果说全蛋白的话没有条带,又有可能是你样品处理的问题了.有可能的话发张图上来帮你看看.
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能否说下你的蛋白样品是如何处理的?是用什么办法提取的蛋白?
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看了楼下说的,我觉得你说的确实有问题,按说浓缩胶里是不会有蛋白条带的,我染色也从来都是把浓缩胶去掉的.应该是染色分离胶啊.看了你提取蛋白的步骤,我觉得也没有什么问题吧,你样品是怎么处理之后点样的?加1/4体积的5倍loading buffer么?
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实在是看不出来问题所在.有空把你的图发到我邮箱 我想看看你的图.
tanzhen613@163.com

样品里面压根就没有蛋白质呗

可能蛋白太浓了,一煮都沉淀了。

浓缩胶里当然没有条带了 ,条带在分离胶里。
可以尝试下银染色,灵敏度远高于考马斯亮蓝染色

应该是蛋白质的问题

sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.主要是我看分离胶里没有蛋白,我就 SDS-PAGE电泳Marker跑不出带,但蛋白样品有带 sds-page电泳时marker少跑出一条带是怎么回事? 跑SDS-PAGE电泳,加热变性的,我知道样品要加loading buffer,marker中加不加loading buffer? SDS-PAGE电泳图,两边是marker,中间两个是样品,个人觉得跑胶现象不明显,如何来分析样品的分子量范围? SDS-PAGE电泳时蛋白Marker的配制要无菌操作吗? SDS-PAGE电泳时蛋白Marker使用前需要煮沸吗? SDS-PAGE电泳为什么Marker跑不出带,但蛋白样品有带 SDS-PAGE 中所用蛋白 Marker 的制作方法,最好详细点, sds-page为什么跑不出蛋白条带?连marker也没有?请高手指教, SDS-PAGE电泳结果没有条带,是什么原因?marker有,但其他点样的条带没有 SDS-PAGE刚跑一会儿溴酚蓝不见了 tricine sds page 与sds page 跑蛋白质电泳有什么区别 SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?连着练了好几天了,每次都不出结果,用相同的样品在别人制的胶上面跑出来就看的清楚,不知道制胶的时候 请问SDS-Page电泳中配置marker时用的缓冲液是什么?怎么配置?和上样buffer一样嘛? native gradient PAGE SDS-PAGE 蛋白纯化的问题我是用镍柱纯化的蛋白 非自然条件下的 包涵体的 但是跑sds-page没有条带或者是很不清楚,今天跑的什么都没有 连marker都没有 电泳液 配胶的液体都是重新陪的 ph也条了 sds-page电泳为什么跑不出蛋白条带?连marker的也没有.请高手指教,详细一点.上样的缓冲液我用的是2×的,与样品混合后100℃水浴10min,加样我加了10ul。应该没有漏胶,因为溴酚蓝跑得挺正常的