Rt-pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带RT-PCR扩增得到的cDNA是什么原因使其在跑电泳之后不出现cDNA条带?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 01:32:33
Rt-pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带RT-PCR扩增得到的cDNA是什么原因使其在跑电泳之后不出现cDNA条带?

Rt-pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带RT-PCR扩增得到的cDNA是什么原因使其在跑电泳之后不出现cDNA条带?
Rt-pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带
RT-PCR扩增得到的cDNA是什么原因使其在跑电泳之后不出现cDNA条带?

Rt-pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带RT-PCR扩增得到的cDNA是什么原因使其在跑电泳之后不出现cDNA条带?
没明白……
cDNA作为互补DNA,就是以mRNA为模板通过RT-PCR合成得到的.所以,PCR产物在核酸电泳EB染色之后应该显示cDNA条带才对.
你若问什么没得到这样的条带,那么很可能是你引物设计的问题,或者是模板RNA提取的问题,又或者是RT-PCR反应体系与程序的问题……
可能的话,再补充一次?

得到的cDNA是单链。
溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸(DNA或RNA)。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小,所以其荧光产率也相对较低。事实上,大多数对单链DNA或RNA染色的荧光时通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。

楼上的,人家是RT-PCR的产物,怎么会是单链啊?
我想应该还是你的试验条件问题。原因有可能是(1)引物设计问题;(2)优化一下硫酸镁的浓度;(3)优化一下退火温度;(4)增加扩增的循环数……