PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 02:40:03
PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次

PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次
PCR没P出条带 很迷茫
提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次

PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次
情况比较复杂,你得确认1.你的RNA没问题,没有被降解,cDNA合成没问题.可以用该材料的actin引物做PCR检测试试.2你P的基因如果是已知序列,那么设计引物应该很简单,如果是未知的,那么兼并引物没P出东西来是有可能的.若是根据已知序列设计的引物而没有P出产物那就是你PCR体系或者Tm有问题了,试试TOUCHDOWN程序.若是兼并引物,采用touchdown程序,没有P出来的话,要么是引物不行,要么是你的材料取材时间不对,你要扩增的基因没有表达出来.问题比较多,一个一个排除,确保你实验的科学性.祝实验成功.

PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次 pcr电泳问题我的pcr出现不正常现象,好几次第一次都没p出东西来 之后我又用第一次p出来的产物再p,终于p出了正常的条带.然后我想多p一些保存,之后我还是用第一次p出来的产物再p之后又不太 PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为什么P不出条带? [PCR,RT-PCR,质粒构建,求助]PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为什么P不出条带? 电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么 高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢, 荧光定量PCR引物为什么要跨内含子设计,大家都说是为了避免提RNA时残留基因组的干扰,但是即使跨了内含子,假如有基因组残留,Real time PCR中还是能P出比cDNA大的一条带(含内含子的条带),探 转基因得到了转化苗,做PCR的时候,如果质粒P出了阳性 对照的基因组没有条带 是不是就能确定没转进去基因第一次做的时候,质粒是阳性的,样品有2个在目的片段那也出现了条带,但很暗,后来再 PCR无法P出目的条带最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.(引物换了很多对儿,卡的 提总RNA RT-PCR 结果可用吗?左边是总RNA,右边是cDNA,现在的问题是,做actin的PCR除了浅浅的目的条带还有大量的 Trizol法提血中的总RNA,跑胶后有的可以显示18S和28带,而有的却什么也没有?为什么呢?曾经用什么条带也没有的RNA样品做RT-PCR后跑胶,结果却有正确的条带显示.是不是与RNA浓度有关呢?同一批血样 土壤细菌总DNA pcr模板量一般多少?小弟新手,最近提取土壤细菌总DNA,pcr一直P不出条带,我感觉多数是模板的问题,请各位大侠们指点一下,一般模板量是多少? PCR电泳,为什么没有条带啊?PCR电泳,第一次跑,一条带都没有.第二次,六条带又有一条没有,这样的情况以前也出现过一次.可以保证到转录出CDNA这一步没有出错,之后操作也没出错.为什么没有了 提取的总RNA跑完电泳条带总是很浅,是提的量少浓度低了还是怎么回事?1%琼脂糖凝胶电泳 tail-pcr的阴性对照出了条带,而加模板的却没出来,怎么回事啊?不知道阴性被什么污染了,出了比较亮的条带,而模板做的tail-pcr却没出来条带,上次做时,都正常,请高手指点一下! 菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确? 在做PCR实验时为什么总是P不出条带? [菌液PCR,测序,DNA提取,求助]菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确?