PCR长的目的片段需要注意什么我设计的引物溶解温度是56.3和60.9度,相差有些大.我的目的片段大概3.7Kbp.我用的天根的Taq酶用通用的时间退火温度56度P出来几百bp的片段,然后又延长退火时间到4

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 15:01:55
PCR长的目的片段需要注意什么我设计的引物溶解温度是56.3和60.9度,相差有些大.我的目的片段大概3.7Kbp.我用的天根的Taq酶用通用的时间退火温度56度P出来几百bp的片段,然后又延长退火时间到4

PCR长的目的片段需要注意什么我设计的引物溶解温度是56.3和60.9度,相差有些大.我的目的片段大概3.7Kbp.我用的天根的Taq酶用通用的时间退火温度56度P出来几百bp的片段,然后又延长退火时间到4
PCR长的目的片段需要注意什么
我设计的引物溶解温度是56.3和60.9度,相差有些大.我的目的片段大概3.7Kbp.我用的天根的Taq酶用通用的时间退火温度56度P出来几百bp的片段,然后又延长退火时间到4分钟改退火温度为53度再P,结果什么也没P出来.怎么办?我在网上查了一下有说要用高保真酶LA Taq和invitrogen的Taq,我同学说我的第一步94度的时间4分钟太长了(不是30循环里的第一步)请问我应该选择什么试剂和什么反应条件才能P出我的目的片段?

PCR长的目的片段需要注意什么我设计的引物溶解温度是56.3和60.9度,相差有些大.我的目的片段大概3.7Kbp.我用的天根的Taq酶用通用的时间退火温度56度P出来几百bp的片段,然后又延长退火时间到4
扩不出来应该是你的退火温度的问题.用不用高保真酶的区别就在于会不会在延长的时候出错.
你可以做一个梯度PCR,如果还是没有扩出来的,那就是你的药品问题了,buffer啊,dNTP啊,酶啊有问题、

PCR在扩增长片段的设计引物时需要注意什么? PCR在扩增长片段的设计引物时需要注意什么? PCR长的目的片段需要注意什么我设计的引物溶解温度是56.3和60.9度,相差有些大.我的目的片段大概3.7Kbp.我用的天根的Taq酶用通用的时间退火温度56度P出来几百bp的片段,然后又延长退火时间到4 PCR加样有什么需要注意的? 大侠们,我现在做PCR,用的是师姐设计的引物序列,怎么才能知道目的基因片段的大小 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? pcr需要注意的问题 PCR引物设计应该注意的问题? 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 表达质粒构建中,做带有目的基因片段的pcr之前,需要对带有目的基因片段的质粒进行酶切吗?... PCR技术的灵敏性提示我们在进行PCR操作中需要注意什么? PCR试验时实验室人员需要注意个人防护吗,做传染病时扩增的基因片段有传染性吗 花露水的瓶子设计需要注意什么 如何确定这个是否是我要的目的基因序列?本人需要获得一个未知的基因,通过设计引物PCR扩增获得了一个片段,但是在进行Blast比对时,选择Highly similar sequence 的话找不到显著相似的序列,而选择 PCR引物设计问题如果我设计的引物,扩增出来的目的片段长度为200BP,但是石蜡包埋组织提取出来的DNA模板大多数在100-120BP长度,那该如何.模板比理论上要扩出来的目的片段长度还短,怎么解决 设计简单的引物;如何通过PCR获得目的基因 自己设计比较完美的引物有个别扩增不出来目的片段或者扩增不够理想,请问是什么原因?有什么方法解决?做梯度PCR也没什么效果,请问该怎么解决? PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 .