Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别
Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别
所用于分析的对象不同.
Northern杂交用于分析RNA；
Southern杂交用于分析DNA；
Western杂交用于分析蛋白质.
大致过程如下：
(1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性.
(2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上.
(3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点.
(4) 让探针与同源DNA片段杂交,然后漂洗除去非特异性结合的探针.
(5) 通过显影检查目的DNA所在的位置.

Northern杂交
主要用于分析RNA,包括正向杂交,反向杂交,斑点杂交
正向Northern杂交是将待测RNA固定在纤维膜上,用特异序列DNA探针与其杂交,再显影观察.
反向Northern杂交是将特异序列DNA固定在纤维膜上,用待测RNA做成探针与其杂交,再显影观察.
Southern杂交
主要用于分析DNA,也包括正向杂交,反向杂交,斑点杂交

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Northern杂交
主要用于分析RNA,包括正向杂交,反向杂交,斑点杂交
正向Northern杂交是将待测RNA固定在纤维膜上,用特异序列DNA探针与其杂交,再显影观察.
反向Northern杂交是将特异序列DNA固定在纤维膜上,用待测RNA做成探针与其杂交,再显影观察.
Southern杂交
主要用于分析DNA,也包括正向杂交,反向杂交,斑点杂交
正向Southern杂交是将待测DNA固定在纤维膜上,用特异序列RNA探针与其杂交,再显影观察.
反向Southern杂交是将特异序列RNA固定在纤维膜上,用待测DNA做成探针与其杂交,再显影观察.
Western杂交
主要用于分析蛋白质,利用了抗原抗体特异性结合的原理.分为抗原法,夹心法,竞争法
抗原法是将待测抗原固定在膜上,加特异抗体与其结合,洗膜,显色,观察
夹心法是将一抗固定在膜上,加待测抗原,洗膜,加特异二抗,洗膜,显色,观察
竞争法是分对照和试验两组,对照组将特异抗原固定在膜上,实验组将待测抗原固定在膜上,都加入特异抗体,显色,观察.用于比较抗原的特异性.

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